银娱优越会geg中国有限公司 服务

研究人员必须阅读并遵守以下准备银娱优越会geg中国有限公司分选样品的指南，以避免潜在的样品排斥。咨询核心设施经理如果您有任何问题或疑虑。

最晚在预定排序前 24 小时联系设施经理以确认或取消您的预约。

与设施经理一起审查排序逻辑和实验设计。准备好提供以下信息：

• 排序的首选日期/时间
• 银娱优越会geg中国有限公司类型和银娱优越会geg中国有限公司起源
• 样本中的大致银娱优越会geg中国有限公司计数和目标银娱优越会geg中国有限公司群的百分比
• 实验设计和氟铬组合
• 已排序单元格的下游应用程序
• 无菌要求

在分选开始之前过滤样品，通过生物安全柜中的无菌 40-80μm 尼龙网运行样品，去除任何银娱优越会geg中国有限公司聚集体。

将样品储存在无菌盖管（12x75mm 卡口管或 15ml 锥形管）中，并贴上适当的标签。

提供部分（1/4-1/3）填充适当收集介质的收集管。

从以下收集媒体中选择：

• 至少含有 20% FBS 的培养基
• PBS（如果收集银娱优越会geg中国有限公司的 RNA 或 DNA）
• 胎牛血清仅适用于非常脆弱的银娱优越会geg中国有限公司

将银娱优越会geg中国有限公司样品以适当的浓度重新悬浮在适当的分选缓冲液中：

• 1x PBS（不含 Ca/Mg2+）
• 1% FBS 或 BSA
• 25mM HEPES pH7.0
• 1mM EDTA（可选，如果样品银娱优越会geg中国有限公司粘稠，如 DC、粒银娱优越会geg中国有限公司、成纤维银娱优越会geg中国有限公司、上皮银娱优越会geg中国有限公司，则使用它）

分选期间将银娱优越会geg中国有限公司重悬于含有 10 单位/ml DNAse 的分选缓冲液中 - 这适用于死银娱优越会geg中国有限公司浓度较高的银娱优越会geg中国有限公司，以避免释放的 DNA 使样品中的银娱优越会geg中国有限公司聚集。

集中待排序的样本。请注意，分选速度（以及分选特定样品的时间长度）将取决于多个因素，包括喷嘴尺寸（取决于银娱优越会geg中国有限公司尺寸）以及样品浓度和总体积。银娱优越会geg中国有限公司越大，使用的喷嘴越大，因此分选速度越慢，分选时间越长。样品浓度越低、总体积越大，分选时间越长。

为了获得最佳分选结果，将样品制备到正确的浓度至关重要。

以接近下表所示值的浓度制备样品。您应该携带额外的分选缓冲液，以防您的样品过于浓缩。  样品的最低浓度为每毫升 1000 万个银娱优越会geg中国有限公司。

包括所有适当的控件来设置银娱优越会geg中国有限公司分选仪器。这包括：

• 每种银娱优越会geg中国有限公司类型/来源至少有一个阴性（未染色和/或同种型；如果这是您第一次对样品进行分类，请携带额外的阴性用于初始设置）。
• 为您在染色中使用的每种荧光基团或染料提供一个补偿样品。您可以使用自己的银娱优越会geg中国有限公司，或者最好使用补偿珠来进行补偿控制。

确保您的补偿控件具有明显尖锐的正峰值，且与负峰值没有重叠。对照管应为每毫升 1x106 个银娱优越会geg中国有限公司。

开始分选之前，您应该清楚了解目标银娱优越会geg中国有限公司的散射曲线和荧光模式。我们建议首先对您的样品进行流式银娱优越会geg中国有限公司术分析。一般来说，目标群体与不需要的银娱优越会geg中国有限公司越离散，分选的纯度和产量就越好

在对新银娱优越会geg中国有限公司样本进行初次分选试验期间，请允许进行一到几次测试分选，以确定最佳分选条件。