研究与教学兴趣

我的研究的主要重点是了解蛋白质生物学活性的分子结构基础。我们使用核磁共振(NMR)光谱,圆形二色性(CD)光谱极化,分子生物学和氢交换化学化学来测量蛋白质的结构和动力学,并将获得的信息与获得的信息与蛋白质的作用相关联。正在研究的蛋白质是膜蛋白,alamethicin和甘油的促剂,以及内在无序的蛋白质,转录的HIV-1反式激活剂。

  1. TAT:转录(TAT)的反式激活器是一种小的RNA结合蛋白,在调节HIV-1复制和治疗潜在感染细胞的方法中起着核心作用。为了增加NMR信号的分散体并允许通过多核NMR光谱进行动态分析,我们已经制备了15N和15N /13C标记的TAT1-72蛋白。我们对TAT动力学的高分辨率NMR分析表明,它是一种本质上无序的蛋白质。
  2. 甘油促进剂:膜蛋白约占所有原核生物和真核蛋白的25%,但研究其结构并折叠滞后于水溶剂溶质的球状蛋白的滞后。甘油促进剂是大肠杆菌中发现的内在膜蛋白,属于一大类蛋白质,可增强极性溶质在非极性膜上的运输。我们已经开发了一种表达和纯化系统,该系统使我们能够研究其二级,第三和第四纪结构以及在几种不同的洗涤剂中的稳定性。右边是蛋白四聚体的CD光谱,显示出芳香的侧链带,这些链链带是折叠蛋白的特征。我们正在探索用于应用NMR光谱法的这些准备。
  3. alamethicin:这种真菌抗生素肽插入膜中并形成电压门控离子通道。我们已经研究了其溶解在甲醇和洗涤剂胶束中的结构和动力学,并完成了甲醇中alamethicin的高分辨率结构测定。这项工作之所以可以使用,是因为我们开发了将生物合成的方法掺入15N和13C中,这是真菌蛋白的第一个这种标记。为了深入了解其作为孔分子的功能,我们已经合成了NMR和CD研究的肽的二聚体。我们还与Burkhard Bechinger教授(Louis Pasteur,Strasbourg)合作,使用脂质双层中的Alamethicin的结构来确定Alamethicin的结构。
  4. 模型酰胺:我们合成了一系列疏水模型酰胺,并通过1H NMR光谱研究了它们的氢 - 偏见交换机制。这项工作首次表明,洗涤剂胶束可以通过限制催化溶剂对胶束内部的访问来减慢交换过程。该结果对研究蛋白质在洗涤剂中的氢交换具有重要意义。     

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