荧光激活的单元格排序

荧光激活的银娱优越会geg中国有限公司分选(FACS)是一种专门的流式银娱优越会geg中国有限公司仪类型,其中基于特定的光散射和荧光特征的异质混合物可以将银娱优越会geg中国有限公司悬浮液的异质混合物分类为四个兴趣群。

将一个时间分类为单银娱优越会geg中国有限公司的液滴,这些液滴通过振动机制从流中折断的单银娱优越会geg中国有限公司。

作为液滴流通过激光束和光检测器,具有符合预设标准的单元格的液滴探测器是用电荷放置的,并在输入指定的收集管之前偏转到不同的角度。。

FACS可用于:

  • 通过单银娱优越会geg中国有限公司隔离建立单克隆转染的单元线
  • 分离特定感兴趣的银娱优越会geg中国有限公司亚群(例如,GFP阳性转染的银娱优越会geg中国有限公司,通过表面标记物染色的谱系负骨髓银娱优越会geg中国有限公司)
  • 诸如癌症干银娱优越会geg中国有限公司等稀有种群的纯化

设备

定价

服务每小时收费,除非另有说明。

费用仅适用于从加载管直到完成排序的实际单元格排序过程。 对于分类咨询,仪器设置(至少一个小时的无菌排序)没有费用)激光热身和仪器关闭过程。

项目曼尼托巴大学行业
第40小时$ 70$ 150
前40小时之后$ 40$ 150
滞纳金$ 55$ 55

在约会开始时间之前的每小时每小时收取每小时的收费。例如,迟到两个小时将产生110美元的延迟费用。

样本准备指南

研究人员必须阅读并遵守以下针对银娱优越会geg中国有限公司分类样品的指南,以避免对样品的潜在拒绝。咨询核心设施管理器如果您有任何疑问或疑虑。

在预定排序前24小时内与设施经理联系以确认或取消您的约会。

与设施管理器一起查看排序逻辑和实验设计。准备提供以下信息:

  • 排序的首选日期/时间
  • 单元格类型和单元格原点
  • 样品中的近似银娱优越会geg中国有限公司计数和目标银娱优越会geg中国有限公司群体的百分比(s)
  • 实验设计和粉红色组合
  • 分类单元格的下游应用
  • 不育要求

在排序开始之前,通过在生物安全机柜中通过无菌40-80μm尼龙网的样品来删除任何银娱优越会geg中国有限公司聚集体。

带有适当标签的无菌管中的样品(12x75mm扣子盖管或15ml锥形管)。

部分提供收集管(1/4-1/3),里面装有适当的收集介质。

从以下集合媒体的选择:

  • 具有至少20%FBS的培养基
  • PBS如果收集RNA或DNA的银娱优越会geg中国有限公司
  • 胎牛血清仅适用于非常脆弱的银娱优越会geg中国有限公司

以适当的浓度以适当的排序缓冲液重新悬浮您的单元样本:

  • 1x PBS(CA/MG2+FREE)
  • 1%FBS或BSA
  • 25mm HEPES PH7.0
  • 1mm EDTA(可选,如果样品单元格是粘性的,例如DC,粒银娱优越会geg中国有限公司,成纤维银娱优越会geg中国有限公司,上皮银娱优越会geg中国有限公司)

在排序过程中重悬于包含10个单位/ml DNase的缓冲液中 - 这是针对具有较高死银娱优越会geg中国有限公司浓度的银娱优越会geg中国有限公司,以避免通过释放的DNA在样品中将银娱优越会geg中国有限公司团结在一起。。

集中要排序的样品。请注意,排序速度(因此,对特定样本进行排序的时间的长度)将由几个因素确定,包括喷嘴大小(取决于您的单元格大小)以及样品浓度和总量。单元格越大,要使用的喷嘴越大,因此排序速度越慢,排序时间越长。样品浓度越低,总体积越大,排序时间越长。

至关重要的是,将样本准备成正确的浓度以获得最佳排序结果。

以接近下表所示的值的浓度准备样本。如果样品过于浓缩,则应携带额外的排序缓冲液。  样品的最低浓度为每毫升1000万个银娱优越会geg中国有限公司。

浓度浓度(单元/ml
排序速度/喷嘴大小 单元类型示例 样品浓度(单元/ml)

高速/70μm喷嘴

脾银娱优越会geg中国有限公司,淋巴银娱优越会geg中国有限公司,小鼠骨髓银娱优越会geg中国有限公司

30-40万

中速/85μm喷嘴

单元线

2000万

低速/100μm喷嘴

DCS,巨噬银娱优越会geg中国有限公司,粒银娱优越会geg中国有限公司

1000万

包括所有适当的控件,以设置用于单元格的仪器。这包括:

  • 至少一个负面(未染色和/或同种型;如果是您第一次进行初始设置的额外设置,则为您第一次进行样品进行排序)。
  • 您在染色中使用的每个荧光体或染料的补偿样本。您可以将自己的单元格或理想的补偿珠用于补偿控制。

确保您的补偿控件具有独特的锐利正峰,与负峰没有重叠。控制管应为每毫升1x106个单元。

在开始分类之前,您应该清楚地了解目标单元的散射曲线和荧光模式。我们建议先对样品进行流式银娱优越会geg中国有限公司术分析。通常,目标群体与不需要的银娱优越会geg中国有限公司的离散越多,分类的纯度和产量就越好

请允许一到几次测试排序以在对新单元样本进行初步试验期间制定最佳排序条件。

流式银娱优越会geg中国有限公司仪分析

流式银娱优越会geg中国有限公司仪是一种基于激光的技术,可以同时对单银娱优越会geg中国有限公司水平的银娱优越会geg中国有限公司的物理和/或化学特征进行多参数分析。

荧光标记的银娱优越会geg中国有限公司被带到鞘液中的传感区域,并一次交叉激光束。在通过一系列光学滤波器后,将有关银娱优越会geg中国有限公司特性,包括银娱优越会geg中国有限公司大小,通过散射光和相对荧光强度的粒度传递到光检测器。然后将这些信息转换为数字电子信号,并通过专门的计算机程序收集以进行进一步分析。

流式银娱优越会geg中国有限公司仪技术可用于多种研究应用程序,例如:

  • 激活状态和氧化爆发
  • 银娱优越会geg中国有限公司活力,凋亡和增殖
  • DNA含量和银娱优越会geg中国有限公司周期分析
  • 基因表达和转移(例如,转染效率)
  • 免疫表型
  • 银娱优越会geg中国有限公司内钙通量
  • 同时分析表面和银娱优越会geg中国有限公司内标记的水平(例如,银娱优越会geg中国有限公司内银娱优越会geg中国有限公司因子水平)

设备

定价

自2025年1月1日生效,该流程核心已更新了其分析仪的使用费为训练有素的用户。银娱优越会geg中国有限公司分类和经理指导服务的费用(包括样品染色,获取和分析)不变。

由学术培训用户采集样本

用法(小时)学术行业
0–150$ 50/hr$ 100/hr
151–300$ 30/hr$ 60/hr
301+$ 10/hr$ 20/hr

核心设施主管的样本采集和分析

用户类型仪器rate
学术lsrfortessa / cytoflexlx / facscanto-ii$ 70/小时
行业lsrfortessa / cytoflexlx / facscanto-ii$ 150/小时

保证快速,可靠和专业工作。无论是用于纸质出版物还是授予申请,我们都会与您合作,以确保您获得适合您需求的质量结果。

FlowJo站点许可程序

Flowjo门户网站许可证是一个基于用户的许可管理系统,用于集团或机构。 Flowjo门户网站为站点管理员提供了改进的管理接口。

定价

每年收取许可费用。

项目学术行业
每年 /每年$ 680$ 1,360

 

荧光显微镜

荧光显微镜是一种光学显微镜,它使用荧光和磷光而不是反射和吸收来研究有机或无机物质的特性。

我们要做什么

可以保证快速,可靠和专业的工作。无论是用于纸质出版物还是授予申请,我们都会与您合作,以确保您获得适合您需求的质量结果。

训练后,欢迎调查人员本身操作荧光显微镜设备。了解更多有关培训机会.

设备

免疫表型

免疫表型是一种用于研究银娱优越会geg中国有限公司表达的蛋白质的技术。

我们将要做什么

是否是实体瘤中外周血或浸润免疫银娱优越会geg中国有限公司的人PBMC,我们可以为您提供全面的服务,从银娱优越会geg中国有限公司染色,样品获取到进食后数据分析。。

我们为人类免疫表型提供了四个生物标志物。如果您想对这些面板进行修改,请与我们联系。

面板1:通用免疫表

生物标志物 荧光色素 克隆
CD3 APCH7 SK7
CD14 FITC M5E2
PDLI(CD274) pe-cy7 mih1
CD19 APC hib19
CD56 percp-cy5.5 B159
CD49D PE 3G8
nkp46 V450 P44-8
livedead Amcyan 胺反应

面板2:幼稚,效应器,内存和调节性T银娱优越会geg中国有限公司

生物标志物 荧光色素 克隆
CD3 APCH7 SK7
CD4 V450 RPA-T4
CD8A pe-cy5.5 rpa-t8
CD25 APC M-A251
CD45RA pe-cy7 HI30
CD127 FITC HIL-7R-M21
CCR7(CD197) PE 150503
dump:cd14/cd19/livedead Amcyan 胺反应

面板3:T银娱优越会geg中国有限公司激活和精疲力尽

生物标志物 荧光色素 克隆
CD3 APCH7 SK7
CD4 V450 RPA-T4
CD8A pe-cy5.5 rpa-t8
CD69 pe-cy7 FN50
CXCR5 PE mu5ubee
PD-1(CD279) APC mih4
lag-3 FITC 17B4
dump:cd14/cd19/livedead Amcyan 胺反应

面板4:B银娱优越会geg中国有限公司激活和调节B银娱优越会geg中国有限公司

生物标志物 荧光色素 克隆
CD19 APC hib19
CD38 APC-H7 HB7
CD27 percp-cy5.5 M-T271
ig-kappa FITC TB28-2
ig-lambda PE 1-155-2
CD69 pe-cy7 FN50
CD24 bv421 ML5
dump:cd14/livedead Amcyan 胺反应

您需要提供的东西

在单银娱优越会geg中国有限公司悬架中准备单元格,让我们照顾其余的。

特殊考虑

如果需要,用户可以选择替换面板中的其他标记,但将增加其他染色抗体的费用。

定价

服务每小时收费,除非另有说明。

项目曼尼托巴大学行业
由调查员执行免费免费
由设施执行$ 70$ 150

我们还提供抗体和试剂的费用每个样品每个面板$ 20如果您不想购买自己的抗体。

联系我们

流式银娱优越会geg中国有限公司术
413 Apotex Center,750 McDermot Avenue
曼尼托巴大学
温尼伯,MB,R3E 0T5,加拿大

204-294-0691
204-789-3921